基因擴(kuò)增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
發(fā)布時(shí)間：2014-04-08 閱讀：473次
PCR原理是由一對(duì)引物介導(dǎo)，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
這種方法的特點(diǎn)是：實(shí)驗(yàn)人員勞動(dòng)強(qiáng)度大，容易因疲勞引起差錯(cuò)；而優(yōu)點(diǎn)是:設(shè)備簡(jiǎn)單，投資少，與自動(dòng)化基因擴(kuò)增儀相比，它無(wú)須升降溫過(guò)程，實(shí)驗(yàn)時(shí)間短，試驗(yàn)接近理想PCR反應(yīng)條件，事實(shí)表明實(shí)驗(yàn)效果還是不錯(cuò)的，但由于標(biāo)本試管從一個(gè)水浴箱往另一個(gè)水浴箱移動(dòng)中要較短暫暴露于空氣中，因此如移動(dòng)速度不夠快時(shí)也會(huì)對(duì)標(biāo)本形成溫度干擾，影響結(jié)果。本方法的另外一些缺點(diǎn)包括只能局限三個(gè)溫階、液體污染以及在低氣壓地區(qū)水溫難以燒到94℃變性溫度等。
基因擴(kuò)增儀在腫瘤的研究中發(fā)揮大作用
1.獨(dú)有的瞬時(shí)斷電保護(hù)功能:瞬時(shí)停電后本儀器可提醒用戶繼續(xù)試驗(yàn)。
2.良好的線性范圍、靈敏度、重復(fù)性:線性范圍廣、可檢測(cè)的樣品濃度線性范圍101~1010,基因擴(kuò)增儀靈敏度小分辨率為1拷貝,重復(fù)性CV≤2.1%。
3.多樣化的運(yùn)行方式:基因擴(kuò)增儀每個(gè)程序段數(shù)多達(dá)9個(gè);每個(gè)程序的步驟多達(dá)9個(gè);每個(gè)程序的循環(huán)數(shù)多達(dá)99個(gè),溫度、循環(huán)等多個(gè)參數(shù)的多種修正、調(diào)節(jié)方式,可完全滿足臨床及科研上試驗(yàn)的要求。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR不但能有效地檢測(cè)到基因的突變，而且可以準(zhǔn)確檢測(cè)癌基因的表達(dá)量。目前用此方法進(jìn)行過(guò)端粒酶hTERT基因、慢性粒細(xì)胞性白血病WT1基因、腫瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、腫瘤相關(guān)的病毒基因等多種基因的表達(dá)檢測(cè)。隨著與腫瘤相關(guān)的新基因的不斷發(fā)現(xiàn)，熒光定量PCR技術(shù)將會(huì)在腫瘤的研究中發(fā)揮大的作用。
